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全過濾無菌均質袋


無菌均質袋(帶整張濾膜)用水
       培養基製備用水應使用電阻率不小於30萬Ωcm的蒸餾水或與其同質的水↟↟,不使用離子交換器生產的去離子水▩••◕▩。
       稱量
       稱量時要用專用的角匙↟↟,避免交叉汙染而影響檢驗結果;乾粉培養基易吸潮↟↟,如有條件↟↟,儘量在溼度較低的房間稱取培養基▩••◕▩。
       覆水
       覆水時不得用銅鍋或鐵鍋↟↟,以防有離子混入培養基中↟↟,影響微生物的生長;容器的大小需大於覆水後培養基總體積的2倍以上↟↟,避免在加熱溶解過程中↟↟,培養基溢位;含有瓊脂粉的培養基↟↟,在加熱溶解之前可以浸泡數分鐘;加熱培養基時一定要進行攪拌↟↟,特別是瓊脂類培養基▩••◕▩。為避免燒焦和沸騰溢位↟↟,對於少量的培養基使用沸水浴進行加熱▩••◕▩。燒糊的培養基營養物質被破壞↟↟,並可產生有毒物質↟↟,如發現焦化↟↟,或未溶解均勻前培養基有溢位↟↟,該培養基即不能使用↟↟,應重新制備▩••◕▩。
       滅菌
       一般培養基採用溼熱滅菌↟↟,即高壓蒸汽滅菌↟↟,通常是121℃ 15 min↟↟,含糖或特殊培養基↟↟,按照國家標準或生產商提供的說明滅菌▩••◕▩。已配製好的培養基必須立即滅菌↟↟,避免微生物生長繁殖而消耗養分↟↟,改變培養基的酸鹼度▩••◕▩。高溫可破壞培養基的營養成分↟↟,還會使瓊脂的凝膠強度下降↟↟,因此必須嚴格控制滅菌溫度和時間↟↟,並且不可重複滅菌▩••◕▩。高壓蒸汽滅菌鍋的壓力錶等要定期進行檢定↟↟,並定期採用生物指示菌法或化學變色紙片對滅菌效果進行驗證▩••◕▩。
       pH測定
       微生物必須在適宜的pH範圍內才能正常生長繁殖或體現其生物特性▩••◕▩。培養基配方要求的pH為滅菌或消毒後的pH值↟↟,即培養基使用前的pH↟↟,並應在25℃溫度下采用精密酸度計進行測量↟↟,固體瓊脂培養基應以特殊的膠體表面測量電極進行測量▩••◕▩。使用過程中↟↟,如果需要調整培養基的pH↟↟,應用1mol/L Na0H或 lmol/L HCL調整↟↟,注意不可反覆調pH↟↟,否則會影響培養基的滲透壓▩••◕▩。
       配製好的培養基儲存
       滅菌以後培養基應該迅速冷卻至所需溫度↟↟,避免長時間儲存在滅菌鍋內↟↟,造成過度滅菌↟↟,影響培養基的營養成分或選擇性效果▩••◕▩。所配製的培養基的量↟↟,應該是在儲存期限內正好使用完▩••◕▩。含染料的培養基應閉光儲存;倒好的瓊脂平板如果配製的當天未使用完↟↟,應於冷藏儲存↟↟,如果儲存時間超過2天↟↟,應將其放入密封的塑膠袋中儲存▩••◕▩。

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